| Reaction Component |
Volume (µl) |
Final Concentration |
Total Volume (µl) |
| ddH2O |
1.74 |
- |
1.74 |
| 2 X High Resolution Melt Master Mix (Roche) |
6.00 |
1.00 X |
6.00 |
| 25 mM MgCl2 |
0.96 |
2.00 mM |
0.96 |
| DNA |
2.00 |
- |
2.00 |
| 20 uM oIMR7338 |
0.05 |
0.08 uM |
0.05 |
| 20 uM 11981 |
0.60 |
1.00 uM |
0.60 |
| 20 uM 11982 |
0.60 |
1.00 uM |
0.60 |
| 20 uM oIMR7339 |
0.05 |
0.08 uM |
0.05 |
|
|
| Step # |
Temp °C |
Time |
Note |
| 1 |
94 |
10 min |
- |
| 2 |
94 |
30 sec |
- |
| 3 |
59 |
1 min |
- |
| 4 |
72 |
45 sec |
repeat steps 2-4 for 35 cycles |
| 5 |
72 |
2 min |
- |
| 6 |
10 |
- |
hold |
|
|